Izolacja kultur drobnoustrojów na podłożach stałych ma jeden główny cel: uzyskanie pojedynczych, odseparowanych kolonii, z których można założyć czystą hodowlę do dalszych badań (identyfikacja, oznaczenia biochemiczne, antybiogram, kontrola czystości). Osiąga się to przez odpowiednią technikę posiewu, która stopniowo zmniejsza liczbę komórek przenoszonych na kolejne obszary płytki.
W zadaniach egzaminacyjnych najczęściej porównia się dwie klasyczne techniki:
- Posiew na całej powierzchni (często wykonywany wymazówką lub bagietką) – materiał rozprowadza się po całej płytce, co sprzyja uzyskaniu równomiernego wzrostu (murawy). Taki posiew jest przydatny np. do uzyskania jednolitego wzrostu w testach wymagających "dywanu" bakterii, ale sam w sobie nie zawsze prowadzi do izolowanych kolonii.
- Posiew sektorowo-redukcyjny (posiew redukcyjny, metoda wyczerpywania na płytce) – wykonuje się kolejne smugi w sektorach/obszarach, każdorazowo przerzedzając materiał. Dzięki temu w dalszych sektorach pojawiają się pojedyncze kolonie, które można pobrać do dalszych analiz.
Dlaczego pozostałe odpowiedzi (inne metody) mogłyby być błędne? Najczęstsze pomyłki wynikają z mylenia technik, które też dają rozproszone kolonie, ale w inny sposób:
- Metody typu posiew wgłębny lub zalewowy mogą dawać kolonie w objętości agaru, a nie tylko na powierzchni – na rysunkach widać wtedy inny charakter wzrostu.
- Rozcieńczenia i posiew ilościowy prowadzą do kolonii rozmieszczonych bardziej losowo na całej płytce, bez typowego "ciągu" przerzedzania w sektorach.
- Wzór wzrostu zależy też od narzędzia (ezą/wymazówką) i sposobu prowadzenia smugi; kluczem jest rozpoznanie, czy występuje kontrolowane przerzedzanie prowadzące do kolonii izolowanych.
Wskazówka egzaminacyjna: szukaj na obrazie (1) obszarów gęstego wzrostu oraz (2) miejsca, gdzie pojawiają się pojedyncze kolonie. Jeśli widoczna jest sekwencja od "gęsto" do "rzadko" w kolejnych polach/smugach, jest to typowe dla posiewu sektorowo‑redukcjnego. Jeśli cały agar jest pokryty podobnie gęsto, to odpowiada posiewowi na całej powierzchni.
